Beim Umgang mit Mikroorganismen ist es wichtig, die aseptische Technik korrekt anzuwenden - sowohl um eine Kontamination Ihrer Mikroorganismen durch äußere Kräfte zu verhindern als auch um sich selbst und die Menschen um Sie herum zu schützen.
Schritte
Schritt 1. Schützen Sie sich
Binden Sie lange Haare zusammen und tragen Sie einen Laborkittel und eine Schutzbrille.
Schritt 2. Waschen Sie Ihre Hände und Ihren Arbeitsplatz
Waschen Sie Ihre Hände mit Wasser und Seife und besprühen Sie die Bank mit 70%igem Ethanol.
Schritt 3. Legen Sie Ihre gesamte Ausrüstung bereit
Stellen Sie sicher, dass Sie alles bereit haben, bevor Sie beginnen.
Schritt 4. Schalten Sie den Bunsenbrenner so hoch wie möglich ein
Sie benötigen es, um Ihre Ausrüstung zu sterilisieren, und der Aufwärtszug verhindert, dass Verunreinigungen von außen auf Ihrer Kultur landen.
Drehen Sie den Kragen so, dass der Luftstrom ganz geöffnet ist
Schritt 5. Sterilisieren Sie die Impföse
Halten Sie es in einem Winkel von etwa 45° nach unten und bewegen Sie es langsam durch die Flamme, so dass es rot-weiß heiß glüht.
- Am einfachsten ist es, die Schlaufe zwischen Daumen und Zeigefinger zu halten und mit dem Mittelfinger zu stützen.
- Der heißeste Teil der Flamme befindet sich direkt an der Spitze des inneren, blauen Feuerkegels.
Schritt 6. Verwenden Sie Ihre andere Hand, um Ihre ursprüngliche Kultur zu ergreifen
- Wenn es sich um eine Platte handelt, halten Sie sie fest und kurbeln Sie den Deckel gerade so weit auf, dass die Schlaufe hineinkommt.
- Wenn es sich um eine Tube mit Deckel handelt, nehmen Sie den Deckel mit dem kleinen Finger der Hand, mit der Sie die Impföse halten, und ziehen Sie dann die Öffnung der Tube zweimal schnell durch die Flamme des Bunsenbrenners. Dies wird als Flammen bezeichnet und tötet alles ab, was in die Röhre gelangen möchte, und erzeugt einen Konvektionsstrom, der Luft aus der Röhre drückt, damit nichts sie erreichen kann. Halten Sie den Deckel für den nächsten Schritt weiterhin mit Ihrem kleinen Finger fest.
Schritt 7. Beimpfen
Berühren Sie mit der Impföse eine Kolonie, die Sie aufnehmen möchten. Wenn Sie aus flüssiger Brühe beimpfen, tauchen Sie die Impföse in das Röhrchen und schütteln Sie die Schlinge, um sicherzustellen, dass Sie genügend Bakterien erhalten.
Schritt 8. Schließen Sie die ursprüngliche Kultur
Wenn es sich um einen Teller handelt, schließen Sie einfach den Deckel und legen Sie ihn wieder ab. Wenn es sich um eine Tube handelt, ziehen Sie die Öffnung zweimal durch die Flamme des Bunsenbrenners und setzen Sie den Deckel wieder auf.
Schritt 9. Öffnen Sie die neue Platte
Heben Sie den Deckel wie zuvor mit der freien Hand gerade so weit auf, dass die Schlaufe hineinkommt
Schritt 10. Platten die Bakterien
Wischen Sie die Impföse leicht über die Oberfläche und achten Sie darauf, den Agar nicht zu durchdringen.
Ein gängiges Streifenmuster ist die Quadrantenmethode
Schritt 11. Schließen Sie die Platte
Schritt 12. Sterilisieren Sie die Impföse
Halten Sie es wie zuvor in einem 45°-Winkel nach unten und bewegen Sie es langsam durch die Flamme, so dass es rot-weiß heiß wird.
Tipps
- Handschuhe sind im Allgemeinen nicht erforderlich. Alle oben genannten Schritte dienen dazu, sich selbst und Ihre Bakterien zu schützen, sodass das Risiko einer Kontamination sehr gering ist. Handschuhe können unangenehme Verbrennungen verursachen, wenn Sie sie versehentlich mit der heißen Impföse berühren.
- Denken Sie daran, dass Sie mit Feuer arbeiten. Es ist keine große Sache, aber seien Sie sicher, dass Sie wissen, was zu tun ist, wenn Sie sich verbrennen; pausieren Sie den Versuch, spülen Sie die Verbrennung mit Wasser und benachrichtigen Sie ggf. Ihren Betreuer.
- Wenn Sie mehrere Läufe mit aseptischer Technik durchführen, ist es nicht notwendig, den Bunsenbrenner zwischen den Läufen vollständig auszuschalten - drehen Sie ihn einfach auf die Zündflamme und schalten Sie ihn erst ganz aus, wenn Sie fertig sind.
